一分鐘了解離子交換層析介質(zhì)！

更新時(shí)間：2021-04-16 點(diǎn)擊次數(shù)：3510

離子交換色譜分離蛋白質(zhì)是根據(jù)在一定pH條件下，蛋白質(zhì)所帶電荷不同而進(jìn)行的分離方法，由基體、配基（離子官能團(tuán)）和反離子三部分組成。填料的物理性質(zhì)有：

具備合適的顆粒大小和較窄的粒度分布范圍；

具備一定的機(jī)械強(qiáng)度；

多孔結(jié)構(gòu)，有一定的孔徑大小和良好的孔徑分布；

填料的溶脹或收縮現(xiàn)象不能超出所允許的限制范圍；

親水性，不會(huì)對(duì)樣品有不可逆吸附。

01 基體

基體是填料中的固體支持物部分，賦予填料一定形狀，同時(shí)讓配基固著或鍵合在上面形成色譜填料?；w一般是多孔的、有一定剛性的固體顆粒。

無(wú)機(jī)材料比如硅膠和多孔玻璃類(lèi)基體，耐壓高、孔徑可控、可制備高效填料，但由于易使蛋白質(zhì)失活和大孔硅膠價(jià)格昂貴而主要用于分析。

有機(jī)材料的基體分兩類(lèi)：高分子聚合物和聚多糖類(lèi)。高分子聚合物主要包括苯乙烯和二乙烯基苯聚合物、聚甲基丙烯酸酯和聚酰胺，耐壓較高，但疏水性強(qiáng)，孔徑不好控制，一般不用于蛋白質(zhì)制備。聚多糖類(lèi)主要包括纖維素、葡聚糖和瓊脂糖，這類(lèi)基體表面電荷呈中性，有大量羥基，親水性強(qiáng)，生物相容性好，孔徑易控制，制得的填料柱容量大，但機(jī)械強(qiáng)度差，經(jīng)過(guò)交聯(lián)后可以使強(qiáng)度提高。

02 配基（離子官能團(tuán)）

配基是固定在基體骨架上的功能基團(tuán)，它是帶電荷的基團(tuán)（強(qiáng)離子交換劑）或是在溶液中可以離解成帶電荷基團(tuán)的官能團(tuán)（弱離子交換劑）。

①?gòu)?qiáng)陰離子交換劑（SAX），如帶三J胺基乙基的季銨鹽型（簡(jiǎn)稱(chēng)Q型）；

②強(qiáng)陽(yáng)離子交換劑（SCX），如磺酸基丙基（簡(jiǎn)稱(chēng)SP）；

③弱陽(yáng)離子交換劑（WCX），如羧甲基（簡(jiǎn)稱(chēng)CM），在一定的pH范圍內(nèi)可離解成羧基陰離子（-CH2COO-）；

④弱陰離子交換劑（WAX），如二乙胺基乙基（簡(jiǎn)稱(chēng)DEAE），在一定pH范圍內(nèi)可結(jié)合質(zhì)子離解成季氨陽(yáng)離子[(CH3CH2)2N+H(CH2)2-]。

03 反離子

與帶電功能基團(tuán)帶相反電荷，可以移動(dòng)，能與帶電樣品分子進(jìn)行交換的離子稱(chēng)為反離子或抗衡離子（也稱(chēng)為平衡離子）。反離子與固定的帶電基團(tuán)的電荷相反，二者之間以靜電力相結(jié)合。反離子的存在有兩種情況：在強(qiáng)離子交換劑中它已存在；在弱離子交換劑中反離子要在一定的pH溶液中才離解形成。

04 月旭離子交換層析介質(zhì)

Q/SP/DEAE/CM Tanrose FF快流速瓊脂糖基架離子交換介質(zhì)